Diferencia entre la fase inversa y la fase normal de HPLC

los diferencia clave entre la fase inversa y la fase normal de HPLC es que la La HPLC de fase inversa utiliza una fase estacionaria polar y una fase móvil menos polar, mientras que la HPLC de fase normal utiliza una fase estacionaria no polar y una fase móvil polar.

La fase normal de HPLC es la técnica más antigua de HPLC que Tswett utilizó en sus separaciones de extractos de plantas; Usaba tiza en una columna de vidrio. Este fue el modo clásico de cromatografía que llevó a denominarlo como la técnica "normal". La HPLC de fase inversa, por otro lado, es lo opuesto a la técnica normal, que los científicos desarrollaron últimamente.

CONTENIDO

1. Resumen y diferencia clave
2. ¿Qué es la HPLC de fase inversa?
3. ¿Qué es la fase normal de HPLC?
4. Comparación lado a lado: Fase inversa frente a HPLC de fase normal en forma tabular
5. Resumen

¿Qué es la HPLC de fase inversa??

La HPLC de fase inversa es una técnica cromatográfica en la que utilizamos una fase estacionaria hidrófoba. Entre todos los métodos de HPLC, utilizamos este método para aproximadamente el 70% debido a su amplia aplicabilidad y reproducibilidad. La fase estacionaria es no polar y la fase móvil es polar..

La mayoría de las veces, los científicos usan una mezcla acuosa de agua con un disolvente orgánico polar miscible, como el acetonitrilo o el metanol como fase móvil. Por lo tanto, los analitos interactúan con la fase estacionaria no polar..

¿Qué es la fase normal de HPLC??

La fase normal de HPLC es una técnica cromatográfica en la que usamos una fase estacionaria hidrofílica. Es el método tradicional de HPLC, aunque no lo usamos mucho. La fase estacionaria es polar, y la fase móvil no es polar. Más importante aún, la fase móvil de esta técnica es 100% orgánica. Significa que no se usa agua para esto..

Figura 01: Un perfil de muestra para cromatogramas de HPLC de fase normal y fase inversa según la polaridad de los componentes en el analito.

Típicamente, la fase estacionaria contiene sílice, ciano, diol, fases con enlaces amino, etc. Las fases móviles incluyen solventes orgánicos tales como hexano, acetato de etilo, etc. Esta técnica se basa en la retención de moléculas de solvente o analito en la fase estacionaria polar.

¿Cuál es la diferencia entre la fase inversa y la fase normal de HPLC??

La HPLC de fase inversa es una técnica cromatográfica en la que utilizamos una fase estacionaria hidrófoba. La fase estacionaria de esta técnica es no polar. La fase estacionaria no es polar, mientras que la fase móvil es polar. Además, los científicos utilizan una mezcla acuosa de agua con un disolvente orgánico polar miscible, como el acetonitrilo o el metanol, como la fase móvil en la HPLC de fase inversa. Considerando que, la fase normal de HPLC es una técnica cromatográfica en la que utilizamos una fase estacionaria hidrófila. La fase estacionaria de esta técnica es polar. La fase estacionaria es polar, mientras que la fase móvil no es polar. Además de eso, los científicos utilizan disolventes orgánicos como hexano, acetato de etilo, etc. como la fase móvil de la HPLC de fase normal. La siguiente infografía presenta la diferencia entre la fase inversa y la fase normal de HPLC en forma tabular..

Resumen - Fase inversa frente a fase normal HPLC

Las técnicas de HPLC de fase inversa y fase normal son dos técnicas de cromatografía líquida. La diferencia entre HPLC de fase inversa y fase normal es que la HPLC de fase inversa utiliza una fase estacionaria polar y una fase móvil menos polar, mientras que la HPLC de fase normal utiliza una fase estacionaria no polar y una fase móvil polar..

Referencia:

1. Las aguas. “Modos de separación de HPLC”. HPLC - Explicación de la cromatografía de líquidos de alto rendimiento: Aguas. Disponible aquí  
2. “Cromatografía líquida en fase normal para la separación de isómeros y compuestos que son inestables en un ambiente acuoso”. Normal_Phase_LC. Disponible aquí